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    CGRP試劑盒操作步驟

    發布時間: 2021-01-25  點擊次數: 345次
       CGRP試劑盒操作步驟:
      實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
      1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕藴势?amp;樣品稀釋液 100μL,余孔分別加標準品或待測樣品 100μL,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育 90 分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
      2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每個孔中加入生物素化抗體工作液 100μL(在使用前 15 分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育 1 小時。
      3. 棄去孔內液體,甩干,洗板 3 次,每次浸泡 1-2 分鐘,大約 350μL/每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
      4. 每孔加酶結合物工作液(臨用前 15 分鐘內配制)100μL,加上覆膜,37℃溫育 30 分鐘。
      5. 棄去孔內液體,甩干,洗板 5 次,方法同步驟 3。
      6. 每孔加底物溶液(TMB)90μL,酶標板加上覆膜 37℃避光孵育 15 分鐘左右(根據實際顯se情況酌情縮短或延長,但不可超過 30 分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。
      7. 每孔加終止液 50μL,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。
      8. 立即用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度(OD 值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
      9. 實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存。
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